La reconstitution in vitro d’équivalents de peau

. Analyse
histologique et immunohistochimique

. Réalisation d’un équivalent dermique

. Epidermisation des équivalents

. Etude de la différenciation des kératinocytes

. Expression des résultats



III. La reconstitution in vitro d’équivalents de peau

Exclusivité GREDECO

  • épithélium néo-formé
  • Analyse immunohistochimique

Analyse histologique et immunohistochimique :

  • de la prolifération épithéliale
  • de la différenciation épithéliale

Exemple : évaluation d’un produit ou de dispositifs émettant des rayonnements lumineux à visée cicatrisante

  • Réalisation d’un équivalent dermique en mélangeant du collagène de type I et des fibroblastes : formation d'une lattice par condensation du collagène dans une étuve à 37°C.
  • Epidermisation des équivalents par implantation d'un fragment d’épiderme.

EpidermisationEpidermisation

Epidermisation des équivalents par implantation d'un fragment d’épiderme.

  • Changements des milieux de culture 2 fois/semaine pendant 2 semaines avec différents facteurs favorisant la croissance épidermique (EGF, hydrocortisone).
  • Etude de la différenciation des kératinocytes dans un équivalent de peau reconstituée in vitro :
    - inclusion en paraffine pour études histologiques standards
    - congélation pour révélation des cytokératines par immunomarquage
    - fixation pour étude ultrastructurale en microscopie électronique.
  • Expression des résultats :
    - Photographies au microscope optique et électronique.
    - Etablissement de scores semi-quantitatifs des immunomarquages de cytokératines

Culture de fibroblastesExpression des résultats

Etablissement de scores semi-quantitatifs des immunomarquages de cytokératines



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